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如何高質量的完成斑馬魚體外受精?

中國斑馬魚資訊中心

研究者A:

這個品系只省一條雄魚,已經18個月了,配魚總是不成功,怎麼讓它傳代呢?

研究者B:

做組學,要2000枚同一個時間點的胚胎,怎麼辦?

如何高質量的完成斑馬魚體外受精?

那就試試“斑馬魚的體外受精”吧~

斑馬魚受精過程簡述

作為熱帶淡水魚類,斑馬魚的精子在相對高鹽度的環境下保持無受精活性狀態,在接觸淡水之後被啟用,活力可維持1-2分鐘。這段時間是接觸卵子受精的最佳時間。因此體外受精技術是要先收集雄魚的精子收集到高鹽度溶液中,隨後再收集雌魚的卵子,最後將精子與卵子混合,加養殖水後啟用,胚胎達到受精目的。

斑馬魚受精實驗分為以下幾個步驟。

1.體外受精實驗的準備:

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2.收集雄魚精液:

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3.收集雌魚卵子,將精液與卵子混合:

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質量好的卵子表現為

金黃色、粘稠、有光澤而結構完整

。鬆散、蒼白、含有絮狀物等情況都是卵子質量不佳的表現。

成功的要點

一寸光陰一寸金

要用

6-18個月齡

的魚,幼年或者年老的魚都不合適。太小的魚容易死哦。

一日之計在於晨

在光週期開始後

1-2小時

為雌魚最佳狀態,之後卵的質量很快變差,所以體外受精一定要在早上進行。

脈脈不得語

實驗前一天,按照正常配魚的操作,將雌雄魚放置在配種缸內用隔板隔開,但是第二天不能抽開隔板。

且更從容等待他

按壓魚腹的操作,對魚傷害很大,不宜頻繁。

同一條魚一個月以上操作一次

,最少間隔半個月。不過一週後可用於自然配魚。

重要的事說三遍

Hanks Buffer的終溶液中的NaHCO3溶液,必須實驗當日早晨新鮮配置!當日早晨新鮮配置!當日早晨新鮮配置!