中國斑馬魚資訊中心
研究者A:
這個品系只省一條雄魚,已經18個月了,配魚總是不成功,怎麼讓它傳代呢?
研究者B:
做組學,要2000枚同一個時間點的胚胎,怎麼辦?
那就試試“斑馬魚的體外受精”吧~
斑馬魚受精過程簡述
作為熱帶淡水魚類,斑馬魚的精子在相對高鹽度的環境下保持無受精活性狀態,在接觸淡水之後被啟用,活力可維持1-2分鐘。這段時間是接觸卵子受精的最佳時間。因此體外受精技術是要先收集雄魚的精子收集到高鹽度溶液中,隨後再收集雌魚的卵子,最後將精子與卵子混合,加養殖水後啟用,胚胎達到受精目的。
斑馬魚受精實驗分為以下幾個步驟。
1.體外受精實驗的準備:
請按住圖片左右滑動
2.收集雄魚精液:
請按住圖片左右滑動
3.收集雌魚卵子,將精液與卵子混合:
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質量好的卵子表現為
金黃色、粘稠、有光澤而結構完整
。鬆散、蒼白、含有絮狀物等情況都是卵子質量不佳的表現。
成功的要點
一寸光陰一寸金
要用
6-18個月齡
的魚,幼年或者年老的魚都不合適。太小的魚容易死哦。
一日之計在於晨
在光週期開始後
1-2小時
為雌魚最佳狀態,之後卵的質量很快變差,所以體外受精一定要在早上進行。
脈脈不得語
實驗前一天,按照正常配魚的操作,將雌雄魚放置在配種缸內用隔板隔開,但是第二天不能抽開隔板。
且更從容等待他
按壓魚腹的操作,對魚傷害很大,不宜頻繁。
同一條魚一個月以上操作一次
,最少間隔半個月。不過一週後可用於自然配魚。
重要的事說三遍
Hanks Buffer的終溶液中的NaHCO3溶液,必須實驗當日早晨新鮮配置!當日早晨新鮮配置!當日早晨新鮮配置!