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細胞培養又失敗了?出現黑膠蟲汙染怎麼辦?這裡有幾個處理建議......

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“黑膠蟲”可寄生於動物細胞,也可以生存於培養基中,依靠細胞和培養基中的營養為生,並隨細胞傳代而傳代。可見“黑膠蟲”是一種異養生物。我們在細胞培養中出現黑膠蟲後汙染怎麼辦?

下面有幾個處理建議,我們一起來了解下吧!

1.換好一點的血清,這樣可以有效減少“小黑點”的形成。

一般的血清都不要去滅活處理,為什麼呢?

因為經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。

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而經過熱滅活的血清,沉澱物的形成會顯著增多,這些沉澱物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受汙染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉澱物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

除非是在做免疫學研究或培養幹細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,才推薦做熱滅活。所以在不是做免疫學研究或培養幹細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞培養時,血清儘量不經熱滅活。

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2.如果是貼壁細胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,就不太好處理拉,可以向其中少加一點滋養細胞。加滋養細胞對有黑膠蟲的剛復甦的細胞很有效!還有就是實驗環境要注意好,保持細胞間整個環境的潔淨度。如果細胞不是非常珍貴,可以用伯氨奎、磺胺、四環素、貝尼爾,也有建議慶大黴素500ug/ml洗滌。

3.換用好的一次性塑膠培養瓶。

4.停止復甦,停止養細胞,徹底消毒所有用於細胞培養的一切用品,包括所用的培養瓶,培養基,吸管,胰酶,孵箱,超淨臺、空間等等你能想到的和細胞培養相關的所有物品。一個星期後,再復甦汙染之前凍存的細胞,注意你的白大衣衣袖汙染即可。這樣你可能覺得動作太大,但可以用一個星期的時間挽救兩個月的時間,還有其他你為了找到汙染源,去除汙染所耗費的精力,和財力。

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5.在換液前先加入生理鹽水並輕輕拍打,沖洗乾淨後再加入培養液,堅持天天洗,傳代時加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,一段時間後,蟲子就會大大減少,對細胞的生長也不會有大的影響。

所有東西最好重配;如果實在要搶救,重點突破,留幾瓶汙染不是很嚴重的細胞搶救,其餘棄去

6.如果有其它可用的細胞,那麼汙染的細胞最好扔掉;如沒有,可試著用抗生素,最可靠的是細菌培養加藥敏,據藥敏結果選擇抗生素,當然不能影響到細胞的狀態。

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7.有材料稱minocycline具有一定的作用,可以和換液結合起來使用。

由於黑膠蟲尚未明確鑑定出是什麼生物,所以上述的處理方法不一定正確,可以供考慮採用。

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